流動相脫氣對于避免HPLC系統(tǒng)出問題,順利得到一個理想的數(shù)據(jù)是一個很有效的措施。HPLC系統(tǒng)內(nèi)是不希望有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時要產(chǎn)生很大的力量,由于氣體的壓縮比與液體相比大的多,因而當(dāng)氣泡存在時,你將觀察到瞬間的流速降低和系統(tǒng)壓力下降。如果這個氣泡足夠大,液相色譜儀生產(chǎn)廠家液相泵將不能輸送任何溶劑,而且如果壓力低于預(yù)先設(shè)定的壓力低限,泵將停止工作。有些泵設(shè)計可以很好地排除氣泡,而也有一些泵設(shè)計當(dāng)氣泡存在時將停止運轉(zhuǎn)。
當(dāng)一個氣泡通過輸液泵時,由于系統(tǒng)壓力大,氣泡通常會溶解在流動相溶液中,隨流動相通過柱子。但是到達檢測器流通池時系統(tǒng)壓力又恢復(fù)到了大氣壓,因而氣泡可能在檢測器流通池中又顯現(xiàn),在色譜圖上會出現(xiàn)不規(guī)律的毛刺。為解決這個問題,有些儀器公司設(shè)計一個反壓控制器,這樣可以在檢測器出口提供足夠的壓力保持氣泡始終溶解在流動相中直到它們流出檢測器。當(dāng)然,液相色譜儀生產(chǎn)廠家這個壓力不能超過流通池所能承受的壓力極限,否則可能損壞檢測器。
紫外/可見光(UV/VIS)檢測器的液相色譜圖中的噪音毛刺通常是氣泡進入并通過流通池的征兆。有些檢測器對空氣的存在也非常敏感,但表現(xiàn)出的征兆與UV/VIS不同,例如有報導(dǎo)說,當(dāng)使用熒光(FL)檢測器時,流動相中溶解氧的存在可能會使一些化合物失去熒光性。此外,對于利用待測物質(zhì)在電極表面發(fā)生氧化還原反應(yīng)引起電流變化而進行檢測的電化學(xué)(EC)檢測器,液相色譜儀生產(chǎn)廠家對流動相中的溶解氧的存在也非常靈敏。此外,氣泡的存在有時還會導(dǎo)致保留時間不重現(xiàn)。
所以,液相色譜儀生產(chǎn)廠家必須注意消除流動相中的空氣,并且還應(yīng)避免空氣由管路(如PTFE管)滲透進流動相中。
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