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制備液相色譜故障排查及解決方案

更新時間:2017-04-24        閱讀:4003
   制備液相色譜中,有三個可以觀察到的狀態(tài):柱壓、檢測器基線、譜圖。通過觀察和記錄這三個狀態(tài)可以監(jiān)測儀器是否正常。若某個狀態(tài)出現(xiàn)異常,故障排查和解決方案如下。
  1、柱壓波動
  1)吸液管路進氣泡
 ?、偃軇┎蛔悖鼮V頭吸入空氣,添加溶劑并排氣泡。
 ?、谖鼮V頭臟了或堵塞,用異丙醇(或5%稀硝酸)清洗。
  ③溶劑中有氣泡(尤其兩種以上溶劑混合),超聲(或抽濾)脫氣。
  2)泵流量不穩(wěn)
 ?、賳蜗蜷y堵塞,大流速purge,若不能解決,則需拆下單向閥(異丙醇)超聲清洗清洗或更換單向閥。
  ②柱塞密封圈磨損,更換密封圈。
 ?、郾妙^污染,柱塞桿往復(fù)活動受阻,清洗泵頭。
  3)柱床塌陷,維修或更換色譜柱。
  4)流動相混合后吸放熱導(dǎo)致溫度變化,以致柱壓波動,如乙腈和水混合吸熱,甲醇和水混合放熱。若影響實驗結(jié)果,則增加柱溫箱或流動相預(yù)混。
  2、柱壓升高或超壓。
  逐段排查堵塞的位置:
  1)先拆下色譜柱,接上兩通運行,若是色譜柱堵塞:
  ①進樣后樣品析出,用合適的溶劑反沖色譜柱。
  ②緩沖鹽析出,用大比例水相的流動相沖洗色譜柱。
 ?、蹤C械雜質(zhì)堵塞篩板,異丙醇小流速反沖色譜柱。
 ?、苌V柱污染嚴重,需維修或充填。
  2)混合器堵塞,維修或更換。
  3)六通閥堵塞,將泵液管路接到連接色譜柱的閥口處,將閥扳至load狀態(tài),用易溶樣品的溶劑小流速沖洗。
  4)壓力傳感器故障,維修或更換。
  3、檢測器基線波動
  1)基線有規(guī)律波動,且幅度較大,則可能有氣泡持續(xù)進入流通池。排查氣泡來源并用異丙醇沖洗檢測器或色譜柱。
  2)基線小幅度規(guī)律波動,可能是檢測器燈能量不足(能量下降后,低波長下靈敏度先下降。
  3)基線漂移。
  ①流動相在此檢測波長下有吸收。更換流動相或改變波長。
 ?、谏V柱或檢測池污染。以異丙醇沖洗色譜柱或檢測池,或?qū)z測池中透鏡玻片取出清洗。
  4、譜圖重現(xiàn)性差
  1)檢查方法設(shè)置,包括流速、梯度、波長。
  2)檢查流動相配置是否有誤,A、B兩相是否放反。
  3)檢查柱壓與之前是否有差異,若有變化,則前面1和2進行排查。
  4)進樣前色譜柱是否*平衡好。
  5)樣品溶解方法。

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